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植物Elisa试剂盒操作流程,减少了实验操作的复杂性

2026年06月03日 10:09:22来源:本生(天津)健康科技有限公司

  植物Elisa试剂盒操作流程,减少了实验操作的复杂性


  植物ELISA试剂盒的标准化操作流程确实能有效减少实验操作的复杂性?,同时降低人为误差,提升检测结果的重复性与可靠性,本生BUNSEN整理标准化流程如下,可参考:

  一、样本制备(按样本类型标准化处理)

  叶片样本?

  优先取感病病变组织,无症状组织也可检测;检测时按?1:10比例?用GEB提取液研磨稀释,例:0.3g组织加3mL GEB提取液,也可先单独研磨出汁液,再按100μL汁液加1mL GEB稀释。

  种子样本?

  每个亚样本取100粒种子,充分研磨破碎后按?1:10比例?加GEB提取液,混匀后室温静置30分钟,取上清作为检测样本。

  特殊样本?

  除植物组织外,还可检测菌丝悬液、水样、土壤样本,如需对应protocol可联系试剂盒厂商获取。

  二、实验前准备

  提前将本生试剂盒所有试剂、待检测样本从2-8℃取出,室温平衡30-60分钟,避免温度差影响反应活性。

  按说明书比例稀释浓缩洗涤液(通常为1×PBST)备用。

  三、加样与孵育

  倒出预包被好抗体的本生的酶标板孔内液体,用1×PBST洗涤3次,用无绒纸巾拍干孔内残留液体;若要提升检测灵敏度,可提前加1×PBST浸泡微孔4分钟后再沥干。

  依次在对应孔位加入100μL处理好的样本,设置空白对照、阴性对照、阳性对照孔,盖上封板膜后37℃孵育(若采用过夜孵育则需4℃)。

  四、洗涤与加酶

  孵育结束后弃去孔内液体,重复洗涤3-5次(手工洗板每孔加液≥300μL,静置30秒再抽吸,每次拍干更换干净吸水纸),最后拍干酶标板。

  按要求加入酶标二抗,再次封板后37℃孵育对应时间,孵育完成后重复洗涤步骤。

  五、显色与读数

  每孔加入现配的TMB底物溶液,37℃避光显色5-30分钟,肉眼可见明显颜色梯度即可终止。

  加入终止液终止反应,15分钟内用酶标仪测定对应波长的吸光度(OD值)。

  六、结果计算

  以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线(推荐4参数逻辑拟合),将样本OD值代入曲线计算浓度后,乘以样本稀释倍数即为最终检测浓度。

  标准化流程将每一步的样本比例、操作时间、洗涤次数都做了明确要求,实验人员只需要按步骤执行,大幅降低了操作复杂度和人为误差。

  注:以上科研产品资料仅供参考!

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关键词:本生BUNSEN,植物ELISA试剂盒,抗原抗体,酶标板,TMB底物溶液
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