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溶酶体作为细胞内重要的酸性细胞器，在自噬、细胞凋亡、免疫防御及代谢调控等生命活动中扮演着关键角色。近年来，随着细胞生物学和肿瘤研究的不断深入，对溶酶体功能动态的实时监测需求日益增长，荧光探针技术因此成为该领域的研究工具。LysoTracker系列溶酶体荧光探针凭借其对酸性区室的高度选择性，被广泛应用于活细胞溶酶体标记、自噬流监测以及溶酶体相关疾病机制研究。面对市场上种类繁多的探针产品，如何选择品质可靠、性能稳定的供应商，是许多科研工作者关注的实际问题。
一、LysoSensor™GreenDND-189产品介绍
LysoSensor™GreenDND-189是一种用于活细胞酸性区室（如溶酶体、顶体）选择性标记的荧光探针。该探针属于向酸性探针，可通过质子化作用在酸性细胞器内累积，这一质子化过程同时可解除染料的荧光淬灭性，使发射的荧光强度增强。与LysoTracker系列探针不同，LysoSensor系列探针的荧光强度呈pH依赖型，随着细胞器酸化程度增加而增强。
本品GreenDND-189具有较低的pKa值（约5.2），适用的pH检测范围为4.5-6.0，仅在酸性区室内才产生荧光。其激发波长（Ex）为443nm，发射波长（Em）为505nm，呈绿色荧光。产品以溶于无水DMSO的1mM储存液形式提供（50μL规格），同时提供mg级粉剂形式。分子式为C??H??N?O?，分子量为398.46。
二、操作使用方法
1.使用前准备
使用前将本品取出回温至室温，并进行简短低速离心，使DMSO溶液集中于管底。溶液状态应在-20℃避光干燥保存，有效期为半年；粉剂状态-20℃避光干燥保存，有效期为2年。建议用无水DMSO将粉剂配制成1-5mM的储存液，首次使用时储存液现配现用，分装成单次用量后于-20℃密封干燥冻存。
2.工作液配制
利用生长培养基或合适的缓冲液将1mM储存液稀释至工作浓度。推荐工作液浓度至少为1µM。工作液需现配现用，不建议保存。为降低探针加载过度可能引起的假阳性，建议在不影响染色效果的前提下尽量使用低浓度。
3.贴壁细胞染色步骤
将细胞置于培养皿中的盖玻片上，加入合适培养基使其爬片生长。待细胞生长到合适密度，吸除培养液，加入适量37℃预热的含探针培养基（须完全覆盖细胞），在适合该细胞类型的生长条件下孵育30分钟至2小时（具体时间因细胞类型而异）。孵育结束后，用不含探针的新鲜培养基替换染色液，在配备合适滤片的荧光显微镜下观察。若染色不够充分，可适当增加染料浓度或延长染色时间。
4.注意事项
若细胞在染色后于不含染料的培养基中继续孵育，会观察到荧光信号的衰减和细胞的空泡化现象。建议根据具体实验条件优化工作浓度和孵育时间。
三、产品选择指南
在选择溶酶体荧光探针时，需根据实验目的和检测需求进行合理选择：
1.根据检测目的选择探针类型
若需要对活细胞中的酸性区室进行选择性标记和染色，可选择LysoTracker系列探针。
若需要测量溶酶体等酸性细胞器的pH值变化，LysoSensor系列探针更为适用，其荧光强度随pH降低（酸化程度增加）而增强。
2.根据荧光颜色选择具体产品
GreenDND-189（绿色荧光）：Ex/Em=443/505nm，适用于常规绿色通道检测。
其他颜色选项包括BlueDND-22（蓝色）和RedDND-99（红色）等。
3.根据细胞类型优化条件
最佳工作浓度需根据不同的实验要求、细胞类型、细胞或组织的膜通透性等进行优化。建议初次使用时设置浓度梯度（如0.1、0.5、1、2.5、5μM等）进行预实验。
四、生产厂家推荐：上海复申生物科技有限公司
上海复申生物科技有限公司（FUSHENBIO）是一家专注从事生物、化学试剂及其试剂盒的高新技术企业；主要以荧光探针，分子探针，核酸/蛋白质标记、细胞检测等技术和产品为研发核心，产品广泛应用于基因合成、细胞检测、活体示踪，抗体标记、新药筛选等领域。复申生物（FUSHENBIO）服务全国各地的众多高校及科研单位、卫生检验检疫部门、环境保护部门、知名药企、食品、化工，CRO公司等用户建立了长期稳定的合作关系；
产品涉及免疫学、细胞生物学、分子生物学、细菌学、遗传学、生物化学、蛋白质学、细胞治疗等领域。
在溶酶体研究领域，复申生物提供LysoSensor™GreenDND-189溶酶体绿色荧光探针（产品编号：FS1412），CAS号为152584-38-8，纯度不低于99%。该产品以1mMDMSO储存液（50μL）或mg级粉剂形式供应，Ex/Em为443/505nm，pKa约为5.2。此外，公司还提供LysoTrackerGreenDND-26（FS1339）、LysoTrackerBlueDND-22（FS1340）、LysoTrackerRedDND-99（FS1341）等多款溶酶体标记探针。
公司依托中国生命科学院和复旦大学的技术平台，拥有专业的销售团队和技术人员。主要代理品牌包括AffinityBiosciences、ZYMORESEARCH、ThermoFisher、MERCK、Corning等。公司承诺对每售出的一件产品提供售前及售后服务。
溶酶体荧光探针作为细胞生物学研究的基础工具，其品质直接关系到实验数据的可靠性与可重复性。LysoSensor™GreenDND-189以其pH依赖性的荧光增强特性，在溶酶体功能动态研究中具有独特的应用价值。在选择供应商时，建议综合考虑产品的技术参数、供应稳定性以及厂商的技术支持能力。上海复申生物科技有限公司作为深耕荧光探针领域的专业供应商，产品线覆盖全面，或可为相关研究提供参考选择。
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