小麦醇溶蛋白ELISA试剂盒如何正确使用?了解其组分是关键
小麦醇溶蛋白ELISA试剂盒包含微孔酶标板、标准品、样本稀释液、检测抗体-HRP、洗涤缓冲液、底物A、B及终止液等。使用时,先取出室温平衡后的板条,剩余密封放回4℃。设置标准品孔和样本孔,标准品孔加入50μL不同浓度标准品,样本孔先加10μL待测样本,再加40μL样本稀释液。按说明书操作,依次加入各组分,注意加样准确,避免交叉污染。洗涤时去除残留物。最后,用酶标仪在450nm波长下测定吸光度,根据OD值计算样品中小麦醇溶蛋白浓度。严格遵循操作指南,确保实验结果的准确性。
TZXD-5040 小麦醇溶蛋白(Gliadin)ELISA试剂盒 96T/48T
以下是小麦醇溶蛋白(Gliadin)ELISA试剂盒的正确使用方法和组分关键说明:
一、核心组分识别与准备
酶标包被板
含预包被Gliadin抗体,使用前需室温平衡30分钟
未用完板条应立即密封放回4℃保存
标准品(16μg/mL)
需用稀释液梯度稀释至0.2-9μg/mL浓度
现配现用,剩余标准品不可重复使用
显色系统
显色剂A/B需避光保存,按1:1比例现混现用
终止液含强酸,操作需戴防护装备
30×洗涤液
使用前需用蒸馏水稀释至1×工作浓度
低温储存时若有结晶,需37℃水浴溶解
二、标准操作流程
样本处理
血清/血浆需2000-3000×g离心20分钟
组织样本按1:5比例生理盐水匀浆
加样步骤
孔类型 操作要求
空白孔 仅加稀释液
标准孔 50μL梯度标准品
样本孔 先加40μL稀释液,再加10μL样本
温育条件
37℃孵育30分钟,避免叠放板条
使用封板膜防止蒸发
洗涤规范
手工洗板需拍干5次,每次静置30秒
洗板机需检查喷头通畅性
显色终止
避光反应10分钟(显蓝色)
终止后15分钟内完成450nm读数
三、关键注意事项
质量控制
标准品需做复孔(CV<15%)
样本OD值应落在标准曲线范围内
安全规范
不同批次试剂禁止混用
所有废弃物按生物污染处理
数据验证
标准曲线R²需>0.99
超标样本需稀释后复测
(注:具体操作请以实际试剂盒说明书为准)
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